Yin-Yang-1 decreases Fas-induced apoptosis in acute lymphoblastic leukemia under hypoxic conditions: its implications in immune evasion / YY1 induce la disminución de la apoptosis a través de Fas en la leucemia linfoblástica aguda en condiciones hipóxicas: implicaciones en la evasión de la respuesta inmunitaria

Abstract Background: Acute lymphoblastic leukemia (ALL) is an aggressive malignant disease with high prevalence in pediatric patients. It has been shown that the downregulation of Fas expression is correlated with an inadequate response in ALL, although these mechanisms are still not well understood. Several reports demonstrated that hypoxia is involved in dysfunctional apoptosis. Yin-Yang-1 (YY1) transcription factor is involved in resistance to apoptosis, tumor progression, and it is increased in different types of cancer, including leukemia. The regulatory mechanism underlying YY1 expression in leukemia is still not understood, but it is known that YY1 negatively regulates Fas expression. The study aimed to evaluate the effect of YY1 on Fas expression under hypoxic conditions in ALL. Methods: Leukemia cell line RS4; 11 was cultured under normoxic and hypoxic conditions. YY1, Fas receptor, and hypoxia-inducible factor (HIF-1α) expression were analyzed. After treatment with a Fas agonist (DX2), apoptosis was analyzed through the detection of active caspase 3. Data were analyzed using Pearson’s correlation. Results: Leukemia cells co-expressed both HIF-1α and YY1 under hypoxia, which correlated with a downregulation of Fas expression. During hypoxia, the levels of apoptosis diminished after DX2 treatment. The analysis revealed that patients with high levels of HIF-1α also express high levels of YY1 and low levels of Fas. Conclusions: These results suggest that YY1 negatively regulates the expression of the Fas receptor, which could be involved in the escape of leukemic cells from the immune response contributing to the ALL pathogenesis.

Resumen Introducción: La leucemia linfoblástica aguda (LLA) es una enfermedad con alta prevalencia en la población pediátrica. El mecanismo por el cual el receptor de Fas participa en la regulación inmunitaria en los tumores es desconocido, pero se sabe que está subexpresado en LLA. El factor de transcripción Ying-Yang-1 (YY1) está involucrado en la resistencia a la apoptosis y la progresión tumoral; se encuentra aumentado en diferentes tumores, incluida la LLA. Aunque los mecanismos que regulan la expresión de YY1 en LLA son desconocidos, se sabe que YY1 regula la expresión del receptor de Fas. El objetivo de este trabajo fue evaluar el efecto de YY1 en la expresión de Fas en condiciones de hipoxia en la LLA. Métodos: Se cultivaron células RS4;11 en condiciones de hipoxia y se analizó la expresión de YY1, receptor de Fas y HIF-1α. La apoptosis fue inducida usando un agonista de Fas (DX2) y se analizó con la detección de caspasa 3 activa. Los datos se analizaron mediante correlación de Pearson. Resultados: Las células RS4;11 coexpresaron HIF-1αy YY1 en hipoxia, lo cual correlaciona con una baja expresión de Fas. La apoptosis se encontró disminuida durante condiciones de hipoxia, después del tratamiento con DX2. El análisis bioinformático mostró que los pacientes con altos niveles de HIF-1αpresentan YY1 elevado y bajos niveles del receptor de Fas. Conclusiones: Estos resultados sugieren que YY1 regula negativamente la expresión del receptor de Fas, lo cual podría estar involucrado en el escape de las células leucémicas a la respuesta inmunitaria, contribuyendo a la patogénesis de la LLA.

Expresión del antígeno CD45 en la Leucemia Linfoide Aguda Pediátrica / Evaluation of CD45 antigen expression in acute lymphoblastic leukemia

Introducción: la leucemia linfoide aguda (LLA) es la neoplasia más frecuente en la infancia. La determinación del antígeno CD45 discrimina entre los blastos y las células reactivas en la médula ósea (MO). Objetivo: evaluar la expresión del antígeno CD45 sobre los blastos de pacientes con LLA, según los distintos subtipos inmunológicos, su posible relación con las características biológicas y clínicas de presentación de la enfermedad y la respuesta al tratamiento antileucémico. Métodos: se estudiaron 150 pacientes con LLA procedentes de varios servicios oncohematológicos del país, entre enero del 2008 y mayo del 2015. El inmunofenotipaje celular de la MO se realizó por citometría de flujo. Resultados: el antígeno CD45 mostró una gran heterogeneidad de expresión sobre los linfoblastos. Del total de enfermos estudiados, 19,3 por ciento no expresaron sobre los blastos el antígeno CD45, 36,7 por ciento presentaron una expresión moderada y 44 por ciento mostraron una alta densidad de expresión. Se encontró diferencia significativa al comparar el fenotipo leucémico con la expresión del antígeno CD45 sobre los blastos (p = 0,000). Ningún enfermo presentó adenopatías mediastinales, con diferencias significativas (p = 0,000), según el fenotipo y la expresión de CD45. Los pacientes con LLA-T cuyos blastos no expresaron CD45 tuvieron una mala respuesta al tratamiento anti-leucémico los días 8 y 15 en sangre periférica y MO, respectivamente. Conclusión: la expresión de CD45 sobre los blastos, pudiera ser considerada como un factor pronóstico adicional para la estratificación en diferentes grupos de riesgos, de la LLA en el niño(AU)

Introduction: Acute lymphoblastic leukemia (ALL) is the most frequent neoplasia in infancy. Determination of CD45 antigen discriminates between blasts and reactive cells in the bone marrow (MO). Objective: To evaluate the expression of the CD45 antigen on the blasts of patients with ALL, according to the different immunological subtypes, their possible relation with the biological and clinical characteristics of the disease and the response to antileukemic treatment. Methods : 150 patients with ALL were studied from various onco-hematological services of the country, between January 2008 and May 2015. The cellular immunophenotyping of the MO was performed by flow cytometry. Results : The CD45 antigen showed a great heterogeneity of expression on the lymphoblasts. Of the total number of patients studied, 19.3 percent did not express the CD45 antigen on the blasts, 36.7 percent presented moderate expression and 44 percent showed a high expression density of it.A significant difference was found when comparing the leukemic phenotype with the expression of the CD45 antigen on the blasts (p = 0.000). No patient had mediastinal lymphadenopathy, with significant differences (p = 0.000), according to the phenotype and CD45 expression. Patients with T-ALL whose blasts did not express CD45 had a poor response to anti-leukemic treatment on days 8 and 15 in peripheral blood and MO, respectively. Conclusion: CD45 expression on blasts could be considered as an additional prognostic factor for stratification in different risk groups of ALL in children(AU)

Inmunidad humoral a tétanos, sarampión y rubéola en niños con leucemia linfoblástica aguda luego del tratamiento quimioterápico / Humoral immunity to tetanus, measles and rubella in children with acute lymphoblastic leukemia after chemotherapy

Los regímenes de quimioterapia y los avances en el soporte clínico han mejorado la supervivencia de los niños con leucemia linfoblástica aguda. Son temas de preocupación las secuelas del tratamiento, entre ellas, el daño inmunológico inducido por la terapia inmunosupresora, que se refleja en la pérdida de niveles protectores de anticuerpos provistos por inmunizaciones previas. Nuestro objetivo fue evaluar la presencia de títulos protectores de anticuerpos para sarampión, rubéola y tétanos en pacientes con leucemia linfoblástica aguda luego de haber finalizado el tratamiento quimioterápico. Se incluyeron 61 niños con leucemia linfoblástica aguda asistidos en el Hospital Garrahan, que habían finalizado el tratamiento, como mínimo, 6 meses antes y con vacunación completa previa al diagnóstico. Las tasas de anticuerpos protectores fueron sarampión: 46% (IC 32-59); tétanos: 53% (IC 40-67); rubéola: 60% (IC 47-63). Estos resultados refuerzan la necesidad de reconsiderar la revacunación en este grupo de pacientes.

Chemotherapy regimens and clinical support advances have improved survival in children with acute lymphoblastic leukemia. The after-effects of treatment are a reason for concern, including damage to the immune system induced by immunosuppressive therapy which is reflected in the loss of antibody protection provided by prior immunizations. Our goal was to assess the presence of measles, rubella, and tetanus protective antibody titers among patients with acute lymphoblastic leukemia after completing chemotherapy. Sixty-one children with acute lymphoblastic leukemia seen at the Hospital Garrahan were included; patients had finished their chemotherapy at least 6 months earlier and had a complete immunization schedule before diagnosis. The rates of protective antibodies were 46% (CI: 32-59) for measles, 53% (CI 40-67) for tetanus, and 60% (CI 47-63) for rubella. These results strengthen the need to reconsider revaccination in this group of patients.

Relationship between complaints presented by emergency patients and the final outcome / Relação entre queixas apresentadas por pacientes na urgência e o desfecho final / Relación entre las quejas presentadas por pacientes en la urgencia y el desenlace final

AbstractObjective: to relate complaints presented by emergency room patients, classified using the Manchester Triage System, with the final outcome (discharge/death/transfer).Methods: prospective cohort study, involving 509 patients who were admitted to the emergency room and remained there for more than 24 hours after admission, being monitored to the final outcome. Data were analyzed with a statistical program using descriptive and analytical statistics.Results: the mean age of the patients was 59.1 years and 59.3% were male. The main complaints were unwell adult (130 - 22.5%), shortness of breath in adults (81 - 14.0%), abdominal pain in adults (58 - 10.0%) and behaving strangely (34 - 5.9%), with 87% of the patients being discharged. More deaths were found in the patients classified in the severe colors, with 42.8% classified as red, 17.0% as orange and 8.9% as yellow. Among the patients classified as green, 9.6% died.Conclusion: in the various colors of the Manchester Triage System, death prevailed in patients that presented the complaints of unwell adult, shortness of breath, head injury, major trauma, diarrhea and vomiting. The higher the clinical priority the greater the prevalence of death.

ResumoObjetivo:relacionar queixas apresentadas pelos pacientes classificados pelo Sistema de Triagem de Manchester em um pronto-socorro com o desfecho final (alta/óbito/transferência).Métodos:estudo de coorte prospectivo, realizado com 509 pacientes que deram entrada no pronto-socorro e que nele permaneceram por mais de 24 horas após a admissão, sendo acompanhados até o desfecho final. Os dados foram digitados e analisados com estatística descritiva e analítica em um pacote estatístico.Resultados:entre os pacientes, 59,3% eram do sexo masculino, com idade média de 59,1 anos. As queixas principais eram de mal-estar no adulto (130-22,5%), dispneia em adulto (81-14,0%), dor abdominal em adulto (58-10,0%), alterações de comportamento (34-5,9%), sendo que, desses, 87% recebeu alta. Foram encontrados mais óbitos nos pacientes classificados nas cores mais graves, sendo 42,8% classificados como vermelho, 17,0% laranja e 8,9% como amarelo. Entre os pacientes classificados como verde, 9,6% evoluiu para óbito.Conclusão:nas diversas cores do Sistema de Triagem Manchester, o óbito prevaleceu nos pacientes que apresentaram a queixa de mal-estar no adulto, dispneia, sofreram trauma craniano, trauma maior, diarreia e vômito. Quanto maior a prioridade clínica maior a prevalência de óbito.

ResumenObjetivo:relacionar las quejas presentadas por los pacientes clasificados por el Sistema de Clasificación de Manchester, en un servicio de urgencia, con el desenlace final (alta/muerte/ transferencia).Métodos:estudio de cohorte prospectiva, realizado con 509 pacientes que dieron entrada en el servicio de urgencia y que en él permanecieron por más de 24 horas después de la admisión, siendo seguidos hasta el desenlace final. Los datos fueron introducidos y analizados con estadística descriptiva y analítica, en un programa estadístico.Resultados:entre los pacientes, 59,3% eran del sexo masculino, con edad promedio de 59,1 años. Las quejas principales eran de malestar en adulto (130-22,5%), disnea en adulto (81-14,0%), dolor abdominal en adulto (58- 10,0%), alteraciones de comportamiento (34-5,9%), siendo que, de estos, 87% recibió alta. Fueron encontradas más muertes entre los pacientes clasificados con los colores más graves, siendo 42,8% clasificados como rojo, 17,0% naranja y 8,9% como amarillo. Entre los pacientes clasificados como verde, 9,6% evolucionó para la muerte.Conclusión:en los diversos colores del Sistema de Clasificación Manchester, la muerte prevaleció en los pacientes que presentaron la queja de malestar en adulto, disnea, sufrieron trauma craniano, trauma mayor, diarrea y vómito. Cuanto mayor es la prioridad clínica mayor es la prevalencia de la muerte.

Correlación de la t(9;22), t(12;21) e hiperdiploidía de ADN con el inmunofenotipo y la tasa de proliferación de células B neoplásicas en niños con leucemia linfoblástica aguda de precursores / Correlation of the t(9;22), t(12;21), and DNA hyperdiploid content with immunophenotype and proliferative rate of leukemic B-cells of pediatric patients with B-cell acute lymphoblastic leukemia

Introducción. Del 60 al 80 % de los pacientes con leucemia linfoblástica aguda de precursores B presentan alteraciones genéticas que influyen en el pronóstico de la enfermedad y en la biología del tumor. Objetivo. Analizar distintas alteraciones genéticas en leucemia linfoblástica aguda de precursores B en niños, y su relación con el inmunofenotipo y con la tasa de proliferación, en comparación con precursores B normales. Materiales y métodos. En 44 pacientes se evaluó, por citometría de flujo, el inmunofenotipo, el contenido de ADN y la proliferación, y por RT-PCR, las traslocaciones t(9;22), t(12;21), t(4;11) y t(1;19). Mediante un análisis jerarquizado de conglomerados se identificaron los patrones inmunofenotípicos de expresión asociados a las traslocaciones, tomando como referencia precursores B normales. Resultados. La cuantificación del ADN mostró que el 21 % de los casos de leucemia linfoblástica aguda de precursores B eran hiperdiploides de índice alto y, el 47,7 %, hiperdiploides de índice bajo. La presencia de hiperdiploidía se asoció con mayor proliferación tumoral y con inmunofenotipos aberrantes, que incluyeron expresión anormal de CD10, TdT, CD38 y CD45 y un mayor tamaño de los linfoblastos. La presencia de t(9;22) y t(12;21) discrimina células normales de células tumorales con aberraciones en la expresión de CD19, CD20, CD13, CD33, CD38, CD34 y CD45. Conclusiones. El perfil de aberraciones fenotípicas detectado en conjunto con anormalidades en la proliferación tumoral, se asocia de forma significativa con hiperdiploidiía de ADN y discrimina de forma clara linfoblastos con t(9;22) y t(12;21) de los precursores B normales. La identificación de estos parámetros será de gran utilidad como herramienta para la clasificación y seguimiento de los pacientes.

Introduction: Between 60 and 80% of patients with B-cell acute lymphoblastic leukemia show genetic abnormalities which influence the prognosis of the disease and the biology of the tumor. Objective: To analyze different genetic abnormalities in acute B lymphoblastic leukemia in children, its relationship with the immunophenotype and the proliferative rate compared with normal B cell precursors. Materials and methods: We assessed immunophenotype, DNA content and proliferative rate in 44 samples by flow cytometry, and translocations t(9;22), t(12;21), t(4;11), and t(1;19) by RT-PCR. Using a hierarchical cluster analysis, we identified some immunophenotypic patterns associated to genetic abnormalities when compared with normal B cell precursors. Results: DNA quantification showed that 21% of the cases had high hyperdiploidy and 47.7% has low hyperdiploidy. The presence of hyperdiploidy was associated with increased tumor proliferation and aberrant immunophenotypes, including abnormal expression of CD10, TdT, CD38, and CD45 and an increased size of the lymphoblasts. The presence of t(9;22) and t(12;21) discriminates normal cells from tumor cells with aberrant immunophenotype in the expression of CD19, CD22, CD13, CD33, CD38, CD34, and CD45. Conclusions: The aberrant immunophenotype profile detected in neoplastic cells along with abnormalities in the proliferative rate were significantly associated with DNA hyperdiploidy and clearly distinguished lymphoblasts with t(9;22) and t(12;21) from normal B cell precursors. The identification of these parameters is useful as a tool for classification and monitoring of these patients.

Mucormicosis cutánea en un paciente inmunocomprometido / Cutaneous mucormycosis in an immunocompromised patient

Mucormycosis is an increasingly emerging life-threatening infection and is an important cause of morbidity and mortality in patients with leukemia. We present the case of a 4-year-old boy with an acute lymphoblastic leukemia complicated by severe and prolonged neutropenia during induction chemotherapy, who developed cutaneous mucormycosis of the elbow. Direct microscopy with KOH and the histopathologic observation of the skin revealed fungal hyphae without septations. The cultures were positive for Rhizopus microsporus var oligosporus. The patient was treated succefully with amphotericin B during 40 days, surgical debridement and dermoepidermic graft. Early recognition and prompt intervention with combined medical and surgical treatment may improve the outcome. The most common management strategy in survivors involves a combination of antifungal therapy with amphotericin B and surgical debridement.

La mucormicosis es una enfermedad emergente grave, producida por hongos saprófitos del orden Mucorales, que afecta fundamentalmente a pacientes inmunocom-prometidos. La forma cutánea se origina por inoculación de esporas dentro de la dermis con el subsecuente desarrollo de una lesión tipo ectima, generalmente única y de evolución rápidamente progresiva, por las características angioinvasoras del hongo, que determina amplias zonas de infartos y necrosis en los tejidos. Presentamos el caso de un paciente con cuatro años de edad, con diagnóstico de leucemia linfoblástica aguda, en quimioterapia de inducción, que cursó con neutropenia profunda y prolongada, presentando una lesión cutánea en el codo compatible con ectima gangrenoso. Recibió tratamiento antimicrobiano y antifúngico, asociado a un aseo quirúrgico. El cultivo para hongos demostró crecimiento de Rhizopus microsporus var oligosporus, y la histología concluyó presencia de hifas no septadas. El estudio de extensión descartó compromiso óseo, sinusal y cerebral. Completó 40 días de terapia antifúngica con anfotericina B deoxicolato, evolucionando satisfactoriamente. Posteriormente requirió injerto dermo-epidérmico. Si bien esta patología es infrecuente, debemos sospecharla en pacientes con neoplasias hematológicas, para establecer un diagnóstico etiológico oportuno, ya que el tratamiento contempla el desbridamiento quirúrgico precoz asociado a antifúngicos sistémicos, siendo de elección anfotericina B.

Importancia de las imágenes y el diagnóstico etiológico en el paciente inmunocomprometido con afección del sistema nervioso central: Segunda parte / Importance of images and etiological diagnosis in the immunocompromised patient with central nervous system envolvement: Part II

We present the case of a 12-year-old boy with acute lymphocytic leukemia who developed pneumonia and multiple brain infarcts compatible with acute necrotic encephalitis. The infectious disease screening tests revealed influenza A H1N1 virus, Staphylococcus aureus in broncho alveolar lavage, E. coli and galactomannan antigen in blood. CNS influenza associated complications are reviewed. This case highlights the importance of magnetic resonance imaging as a diagnostic tool in the assessment of immunocompromised patients with CNS compromise and the value of brain biopsy in the final identification of an infectious disease etiology.

Escolar de 12 años de edad, con Leucemia Linfocítica Aguda en tratamiento que desarrolla una bronconeumonía bilateral, infartos cerebrales compatibles con encefalitis necrosante aguda. El estudio infectológico demostró más de una causas infecciosa que pudiera explicar su evolución destacando influenza A H1N1, Staphylococcus aureus meticilina sensible en lavado bronco alveolar, E. coli y galactomanano en sangre. Se revisa el compromiso del SNC por influenza A H1N1. Se destaca la importancia del uso de resonancia magnética nuclear al evaluar pacientes inmunocomprometidos con complicaciones neurológicas y el aporte de una biopsia cerebral en aclarar la etiología de este compromiso.

Immune status & enzymes activity in blood lymphocytes in adult patients at different stages of acute lymphoblastic leukaemia.

Background & objectives: Pathogenesis acute lymphoblastic leukaemia (ALL) in adults is not well understood, as it is more common in children. We examined the immunological status and the activity of certain enzymes in blood lymphocytes in adult patients of ALL at different stages. Methods: ALL patients (n=71) admitted during 2000-2005 were included in this study. All patients had decreased T-lymphocytes content. At first attack, they had CD4 +-cells decreasing and increasing IgM and IgG concentration. In complete remission all examined parameters were low. The peculiarities of ALL recurrence were high NK-cells content and disbalances of the main immunoglobulin concentrations. Results: In the first attack and recurrence the anaerobe glucose oxidation intensity and the reactions of macromolecular synthesis were lower in lymphocytes compared to control. In remission all these processes restored to normal. In all stages in lymphocytes GR had decreased activity. Interpretation & Conclusions: Our results showed that most of changes in immune status of ALL patients were in a stage of complete remission when patients arrived on its maintenance through the small period from spent before therapy when the immune system of the patient has not been restored. Thus, probably cytostatic action causes immune failure in the future and starts disease again.

Implications of infectious diseases and the adrenal hypothesis for the etiology of childhood acute lymphoblastic leukemia

Acute leukemia is the most frequent cancer in children. Recently, a new hypothesis was proposed for the pathogenesis of childhood acute lymphoblastic leukemia (ALL). The so-called "adrenal hypothesis" emphasized the role of endogenous cortisol in the etiology of B-cell precursor ALL. The incidence peak of ALL in children between 3 to 5 years of age has been well documented and is consistent with this view. The adrenal hypothesis proposes that the risk of childhood B-cell precursor ALL is reduced when early childhood infections induce qualitative and quantitative changes in the hypothalamus-pituitary-adrenal axis. It suggests that the increased plasma cortisol levels would be sufficient to eliminate all clonal leukemic cells originating during fetal life. Because Brazil is a continental and tropical country, the exposure to infections is diversified with endemic viral and regionally non-viral infections, with some characteristics that support the recent adrenal hypothesis. Here we discuss this new hypothesis in terms of data from epidemiological studies and the possible implications of the diversity of infections occurring in Brazilian children.

Leucemia linfoide aguda común: estudio del inmunofenotipo y las características clínicas y morfológicas / Common acute lymphocytic leukemia: study of the immunophenotype and of the clinical and morphological characteristics

Se estudiaron las características biológicas, clínicas, de laboratorio y fenotípicas de 87 niños con leucemia linfoide aguda común (LLA-c) en un período de 17 años. El inmunofenotipaje celular se realizó mediante los métodos inmunocitoquímicos (UMICIQ) y de fosfatasa alcalina anti-fosfatasa alcalina (APAAP). Se observó una mayor incidencia (52,9 por ciento) en el grupo de edad entre 2-5 años. Los niños varones blancos fueron los más afectados. El 98,8 por ciento de los enfermos presentó la variedad L1. En el 79,3 por ciento los leucocitos fueron de <20x109/L y no se demostraron adenopatías mediastínicas al inicio de la enfermedad. El 4,6 por ciento de los enfermos presentó infiltración del sistema nervioso central (SNC) al inicio. Se encontró hepatomegalia, esplenomegalia y adenopatías en el 47,1 por ciento, 24,1 y 31 por ciento, respectivamente. Los antígenos CD10, CD19 y Tdt se encontraron en el 100 por ciento de los pacientes, el CD22 en el 98,8 por ciento, el HLA-DR en el 96,5 por ciento y el CD20 en el 6,9 por ciento. Se diagnosticaron 14 (16,1 por ciento) LLA-c Mi+; de estas 6 (42,8 por ciento) presentaron leucocitos de >20x109/L. Estos resultados demuestran que la LLA es una enfermedad clínica y fenotípicamente heterogénea, que representa expansiones clonales de linfoblastos en distintos estadios de maduración

Clasificación de las leucemias agudas de acuerdo con el consenso de la primera conferencia latinoamericana en la tipificación inmunológica de las leucemias / Classification of acute leukemias according to the first Latinoamerican consensus conference for the immunophenotyping of leukemia

Objetivo. Evaluar las recomendaciones del consenso de la primera conferencia latinoamericana en la tipificación inmunológica de las leucemias agudas (LA) en pacientes con LA de novo, sin tratamiento previo y clasificados inmunológicamente empleando citometría de flujo y un panel extenso de anticuerpos monoclonales. Material y métodos. En la conferencia mencionada se decidió el empleo de los siguientes anticuerpos: CD79ac (c = citoplásmico) y CD19 para definir a la LA de linaje linfoide B (LAL-B); CD3c y CD7 para la LAL de estirpe T (LAL-T) y CD13, CD33 y mieloperoxidasa (MPOc) para la LA mieloide (LAM). Se analizó la expresión de estos antígenos celulares en 91 pacientes, no consecutivos, clasificados con el panel extenso como: LAL-B 28 casos; LAL-T 7; LAL-B-T 2; LAM 47 y LA de linaje mixto 7 casos. Resultados. Los 28 pacientes con LAL-B mostraron positividad con cada uno de los dos anticuerpos recomendados (CD79ac y CD19), mientras que, en 24 casos con LAM (en 23 casos no se estudió la expresión del CD79ac) y en 7 con LAL-T ambos antígenos estuvieron ausentes. Los antígenos CD3c y CD7 se identificaron en el 71 por ciento y 100 por ciento de los casos con LAL-T, respectivamente. El CD7 no se expresó en ninguno de los 28 casos de LAL-B pero si en 6 de los 47 casos de LAM, mientras que, el CD3c fue negativo en los 75 casos estudiados con LAL-B y LAM. El 49 por ciento de las LAM expresaron los tres marcadores recomendados (MPOc, CD13 y CD33), y el 51 por ciento de los casos resultaron positivos a uno o dos de estos tres anticuerpos. Seis de las 28 LAL-B tuvieron expresión aberrante de antígenos mieloides (3 casos del CD33 y 3 del CD13). Conclusiones. No hubo diferencia en la definición de linaje de las LA entre emplear el panel extenso de anticuerpos y el mínimo recomendado por el consenso latinoamericano.

Assessment of residual disease in acute leukemia by means of polymerase chain reaction / Evaluación de enfermedad residual en leucemia aguda por medio de reacción en cadena de la polimerasa

Empleando reacción en cadena de la polimerasa (PCR) se buscaron marcadores moleculares específicos en 75 pacientes consecutivos con leucemia aguda en una sola institución a lo largo de un periodo de cinco años. En leucemia aguda linfoblástica se buscaron BCR/ABL t (9:22), TEL-AML1, t (12:21) y rearreglos clonotípicos de los genes de inmunoglobulinas, en tanto que en leucemia aguda mieloblástica se buscaron PML-RARa t (15:17), AML1-ETO t (8:21) y CBFb-MYH11 (inv16). Se identificaron marcadores moleculares en 15 de 75 casos: cuatro LAL (tres rearreglos de Ig y uno BCR/ABL) y 11 LAM (9 PML/RARa y 2 AML1/ETO). A lo largo de seguimientos de 1 a 60 meses después de haber hecho el diagnóstico, en siete pacientes se eliminó la enfermedad residual evaluada por PCR (ER-PCR) y en ocho persistió. Para pacientes sin o con ER-PCR, la supervivencia (SV) a 30 meses fue de 86 por ciento y 14 por ciento, y la mediana de SV >60 y dos meses, respectivamente (p < 0.01). Seis de los ocho pacientes con ER-PCR fallecieron y en dos se pudo lograr una nueva remisión molecular. Dos de las tres recaídas moleculares pudieron detectarse antes de la recaída hematológica florida. Se concluye que la PCR es útil para vigilar la persistencia de ER en leucemia aguda y en ocasiones, para decidir los tratamientos antileucémicos de rescate, de manera oportuna.

Bacterias en el citoplasma de leucocitos de pacientes inmunocomprometidos: un hallazgo citológico poco frecuente. A propósito de dos casos / Bacteria in the cytoplasm of leukocytes of immunocompromised patients: an uncommon cytological finding. A report of two cases

Se comunican los aspectos clínicos y citológicos de dos pacientes con compromiso inmunológico: una mujer con lupus eritematoso generalizado y un niño con leucemia aguda linfoblástica, quienes recibieron tratamiento inmunosupresor y citotóxico. En los dos casos se observaron bacterias en el citoplasma de los leucocitos (Escherichia coli, Staphylococcus y Streptococcus pneumoniae), hallazgo poco frecuente que puede ser útil para establecer tratamientos oportunos y disminuir la morbilidad y la mortalidad. Se revisan también, brevemente, los efectos de los padecimientos y los tratamientos inmunosupresores. La observación de bacterias intraleucocitarias no es común, por lo cual requiere una adecuada capacitación en citología hematológica y un examen minucioso de las preparaciones rutinarias para las cuentas celulares de la citometría hemática.

Immunophenotyping of acute lymphoblastic leukemia in pediatric patients by three-color flow cytometric analysis.

Immunophenotyping of acute lymphoblastic leukemia (ALL) in children using three-color flow cytometry was carried out at Chulalongkorn Hospital, Bangkok, Thailand. Of 38 patients with acute lymphoblastic leukemia, 65.8% were identified as common ALL, 15.8% were B-ALL, and 18.4% were T-ALL. Of these 38 cases, there were 4 cases of infantile leukemia. Relapsed cases of leukemia were found most in B-ALL up to 3 out of 6 cases and to a lesser extent in T-ALL (1 of 7 cases) and c-ALL (1 of 25 cases). Our data showed the CD markers expression for common ALL (c-ALL) were CD19+/10+ (100%), CD20+ (24%), CD22+ (100%), HLA-DR+ (70.1%), and CD34+ (58.8%). CD markers expression for B-ALL were CD19+ (100%), CD20+ (33.3%), CD22+ (80%), and HLA-DR+ (80%). CD markers expression for T-ALL were CD3+ (42.9%), CD5+ (100%), CD7+ (85.7%). Myeloid aberrant expressions were found in c-ALL (25-37.5%), B-ALL (20%), and T-ALL (14.3%). The significance of the aberration is discussed. The immunophenotyping classification of ALL as c-ALL, B-ALL, and T-ALL is useful in prognosis and treatment.

Childhood acute lymphoblastic leukaemia: arabian perspective

The immunophenotypic pattern of acute lymphoblastic leukemia [ALL] varies with race and geographical location. The pattern in Eastern Saudi Arabia was not reported before. This study was performed to compare the pattern of childhood ALL immunophenotype in Eastern Saudi Arabia with those previously reported in other parts of the world. Analysis of 32 consecutive cases of childhood ALL seen in Eastern Saudi Arabia [1991-1996] was performed. Immunophenotype was analyzed by flowcytometry of blood and bone marrow samples. In the 32 analysed cases, common ALL was the commonest phenotype [68.7%]. Pre-B and B-ALL accounted for 9.3% each. Early pre-B ALL and T-ALL were the least common each accounting for 6.2%. Mixed lineage leukemia occurred in 3% of cases. These findings suggest lower prevalence of T-ALL and early Pre-B ALL in Arabs. The most prevalent phenotype is common ALL as in the rest of the world. In this study we found that the immunophenotypic pattern of childhood ALL is different in Arabs which may influence the outcome of the disease in this population

Lymphoblastic transformation of myelodysplastic syndrome

Mielodysplastic syndromes (MDS) are clonal disorders of the hemopoietic stem cell. About one third of the cases terminate in an acute leukemia, usually acute myeloblastic leukemia. However, few cases of transformation into acute lymphoblastic leukemia (ALL) have been described. We present a case of refractory anemia that transformed into ALL two months after diagnosis and was successfully treated with conventional chemotherapy. Two years later a hyperfibrotic form of MDS was detected in the patient, that soon after terminated in acute megakaryoblastic leukemia. The course of MDS in the present case provides evidence that MDS can involve a pluripotent stem cell, presenting clonal evolution, documented by successive changes in its clinical and hematological features.

HLA y Leucemias. Estudio de 144 casos / HLA and leukaemias. A estudy of 144 cases

Se determinaron frecuencias de 33 antígenos HLA de los loci-A,B y C en 144 pacientes leucémicos: 89 con leucemia linfoblástica aguda (LLA), 28 con leucemia aguda no linfoblástica y 27 con leucemia mieloide crónica, estratificados fenotípicamente en blancos, negros y mestizos, para evaluar la posible asociación entre estos marcadores genéticos con dichas enfermedades. Los antígenos HLA-A19 (19) mostraron asociaciones negativas con la LLA con un riesgo relativo (RR) de 0,08 y de 0,84, respectivamente. Se obtuvieron frecuencias estadísticamente significativas con una pc < 0,02 para el A19 y pc < 0,002 para el A-29, al compararlos con controles normales no relacionados. Los enfermos con LLA blancos positivos al antígeno HLA-A19 mostraron asociaciones negativas (RR =0,10, p < 0,002) en relación con los controles blancos. Estos resultados sugieren protección individual y poblacional o ambas (fracción preventiva (FP) > 0), al desarrollo de LLA. El resto de los antígenos, HLA estudiados no mostraron asociación con leucemias

Producción de anticuerpos policlonales monoespecíficos contra la droga antileucemica L-asparaginasa / Production of monospecific polyclonal antibodies against the antileucemic drug L-asparaginase

Los anticuerpos han sido ampliamente utilizados como marcadores en la detección y localización de moléculas específicas. En base al método de Cevenini et al. (1991) y utilizando bajas dosis del inmunógeno L-Asparaginasa, se obtuvieron anticuerpos policlonales desde tumores ascíticos inducidos en ratón. El fluído ascítico se sometió a fraccionamiento con sulfato de amonio y a diálisis. Por Western Blot se evidenció un enriuecimiento en inmunoglobulinas y mediante Dot Blot se determinó la especificidad del anticuerpo frente al antígeno. El abundante pool de anticuerpos obtenidos tiene alta snsibilidad por el antígeno ya que no presenta relación cruzada con los epítopes probados